美军16日连续第五天对伊朗多地发动袭击，称“旨在进一步削弱伊朗威胁途经霍尔木兹海峡商船的能力”。伊朗予以反击，称摧毁美军位于巴林、科威特、约旦境内的多处军事基地设施。随着美伊冲突持续，双方一个月前达成的停火谅解备忘录岌岌可危。伊朗伊斯兰议会议长、对美谈判首席代表卡利巴夫15日说，目前正在进行的是一场关乎伊朗生死存亡的战争，但不应将谈判与防御割裂开，只选择其一作为解决方案，是战略错误。同日，曾率领美国代表团与伊朗达成谅解备忘录的美国副总统万斯表示，单靠武力无法赢得伊朗战事，他批评以色列政府内部某些势力出资发动舆论攻势，蓄意破坏美伊谈判，以使战争无限期持续下去。
伊朗医院紧急转移儿童病患
美联社称，16日清晨，美国加大对伊朗的打击力度，袭击了更靠近伊朗北部的目标，近一个月来首次波及伊朗首都德黑兰周边地区，德黑兰启动防空系统。同日，美军还袭击了一艘经公海驶向伊朗石油出口枢纽哈尔克岛的空载油轮“贝尔马”号，向该船发射“地狱火”导弹，使其丧失航行能力。
据伊朗新闻电视台报道，美军的最新袭击波及伊朗西南部的一家癌症医院，211名正在接受化疗的儿童患者被迫紧急疏散，伊朗谴责美国这一“野蛮的战争罪行”，称这“让人想起以色列对医疗机构的暴行”。伊朗卫生部表示，截至15日，美国对伊朗的最新一轮袭击已导致300多人受伤，35人死亡。
16日，美军位于巴林的谢赫伊萨空军基地、科威特的阿里·萨利姆空军基地、科威特舒艾拜的美军码头、位于约旦阿兹拉克的美军基地遭到伊朗袭击。伊朗伊斯兰革命卫队发言人称，伊朗目前的行动集中于摧毁美国在该地区的“进攻性基础设施”，下一步行动随后将展开，“敌人不要以为能继续维持当前的战斗态势，并把战事拖成消耗战”。